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AAV在眼部注射方法有哪些

在眼科疾病的基因治疗中，AAV载体的应用主要包括不同注射方法的选择。其中，玻璃体腔注射和视网膜下腔注射是较为常见的途径。通过对比研究，玻璃体腔注射主要感染神经节细胞和Müler细胞，可能会触发体液免疫反应，影响后续治疗。

视网膜下腔注射适用于RPE细胞和光感受器细胞的转导，主要步骤包括麻醉、切口制作、插入注射针、开始注射、缓慢出针，以及避免切口处感染等。此方法可避免触发体液免疫反应，对另一只眼再次视网膜下注射无影响。在选择注射方式时，应考虑疾病的性质，同时选择对小鼠最便利的方式。

常见问题解答包括：rAAV中枢注射滴度和注射体积一般是多少？滴度10^12 vg/mL，体积200-300nL左右。AAV感染小鼠后多久可以观察结果？一般情况下，三周后可在胞体检测到信号，六周后可在末梢检测到信号。

特别是AAV-VEC，研究人员成功实现了vWF基因的表达，这对于治疗血管性血友病等遗传性疾病提供了突破性的治疗手段。例如，WF缺陷型小鼠通过静脉注射，利用AAVsig的I-587位七聚体肽靶向内皮细胞，显著提高了转导效率。

实现特异性表达的方法包括选择组织特异性血清型、使用细胞特异性启动子以及局部注射等。通过优化AAV血清型、启动子选择与注射策略，可实现目标组织或细胞的精准基因传递与表达，为基因治疗与科研提供强大工具。针对特异性表达的策略不断优化，AAV的应用领域与潜力持续扩展。

值得注意的是，常见的消毒剂如乙醇、乙醚和氯仿对AAV病毒无效，因此使用酒精消毒并不能有效地清除病毒。更推荐使用清水清洗、高压消毒、强氧化性消毒液（如巴斯消毒液）或强碱性液体浸泡等方法，以确保有效消除病毒污染。